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7-Aminoactinomycin D，简称7-AAD，是一种核酸染料，与DNA 结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI 相似，可被488nm 氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与多种488 激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。
另外，7-AAD 是一种非渗透性荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA 结合，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞仪。

储存条件：染液2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。试剂B 2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。玻璃器皿上残留的去垢剂也会影响染色的效果，导致细胞存在或不存在都会出现强荧光。玻璃器皿的清洗应用去垢剂，然后用自来水冲洗数遍后，用去离子水或蒸馏水多次漂洗。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头 ● 流式细胞仪或荧光显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
●细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
● 由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程，因此最好在染色后立即进行分析。
●染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
本染色试剂盒可用于大多数细胞，但不同的细胞类型、细胞密度、使用的培养基以及其他一些因素都有可能影响染色效果，本说明仅供参考。细胞染色也可不用多聚甲醛固定，其他方法请参阅相关资料。

1．染色工作液的配制：用纯水10倍稀释试剂B。
根据样品数用此稀释液将7-AAD染色液20倍-100倍稀释，配制成染色工作液。
2．离心收集细胞，并用合适的的缓冲盐溶液或者培养基(pH=7.4)重悬细胞。
【注】：贴壁细胞可在盖玻片或者培养板上进行原位染色。
3．细胞固定：用4%多聚甲醛固定5分钟；根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。
4．加入适量7-AAD染色液工作液，孵育15-60分钟。
5．用荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发波长为545nm，最大发射波长为650nm。流式细胞仪下(FL3 通道)检测荧光强度。
相关搜索：7-AAD染色试剂盒